广东地区不同基因型血红蛋白H病的血液学特征分析

张艳霞; 杜倩怡; 王继成; 杜丽; 秦丹卿; 姚翠泽; 袁腾龙

doi:10.3969/j.issn.0253-9802.2020.12.010

新医学 >

2020 , Vol. 51 >Issue 12: 939 - 942

DOI: https://doi.org/10.3969/j.issn.0253-9802.2020.12.010

研究论著

广东地区不同基因型血红蛋白H病的血液学特征分析

张艳霞 ,
杜倩怡 ,
王继成 ,
杜丽 ,
秦丹卿 ,
姚翠泽 ,
袁腾龙

展开

511442 广州,广东省妇幼保健院医学遗传中心

袁腾龙,E-mail: ytlgreat@163.com

Copy editor: 洪悦民

收稿日期: 2020-06-28

网络出版日期: 2020-12-24

基金资助

广东省医学科研基金(B2019150)

版权

收起

Analysis of hematological characteristics of hemoglobin H diseases with different genotypes in Guangdong Province

Zhang Yanxia ,
Du Qianyi ,
Wang Jicheng ,
Du Li ,
Qin Danqing ,
Yao Cuize ,
Yuan Tenglong

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Medical Genetics Center, Guangdong Women and Children Health Care Hospital, Guangzhou 511442, China

Yuan Tenglong, E-mail: ytlgreat@163.com

Received date: 2020-06-28

Online published: 2020-12-24

Copyright

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摘要

目的分析广东地区血红蛋白H（HbH）病的血液学特征,为临床遗传咨询及产前诊断提供参考。方法对广东地区283例经血红蛋白电泳和基因诊断确诊的HbH病患者进行血液学特征分析,采用血常规检测及Hb电泳方法分别获取各种基因型HbH病的红细胞参数及各类型Hb含量,使用裂口PCR和PCR结合反向点杂交方法进行地中海贫血基因检测。结果 283例HbH病患者中,缺失型HbH病202例（71.38%）,包括132例--^SEA/-α^3.7和70例--^SEA/-α^4.2;非缺失型HbH病81例（28.62%）,分别为7例--^SEA/α^QSα、 46例--^SEA/α^WSα和28例--^SEA/α^CSα。非缺失型HbH病患者（除--^SEA/α^WSα外）Hb为（78.69±15.65）g/L,比缺失型HbH病患者的（96.69±15.72）g/L低（P < 0.001）。非缺失型HbH病患者（除--^SEA/α^WSα外）HbH为（15.65±6.18）%,比缺失型HbH病患者的（7.00±4.18）%高（P < 0.001）。其中孕妇的红细胞计数较低,为（3.37±0.71）×10¹²/L,Hb仅（66.75±14.27）g/L。结论在广东地区HbH病中,缺失型HbH病例占大多数,主要以--^SEA/-α^3.7为主,其次为--^SEA/-α^4.2。非缺失型HbH病患者贫血程度较缺失型HbH病患者重,HbH病的孕妇贫血程度更为严重。

关键词： 血红蛋白H病; 地中海贫血; 血液学特征

本文引用格式

张艳霞 , 杜倩怡 , 王继成 , 杜丽 , 秦丹卿 , 姚翠泽 , 袁腾龙 . 广东地区不同基因型血红蛋白H病的血液学特征分析[J]. 新医学, 2020 , 51(12) : 939 -942 . DOI: 10.3969/j.issn.0253-9802.2020.12.010

Abstract

Objective To analyze the hematological characteristics of hemoglobin H （HbH） diseases in Guangdong Province to provide guidance for clinical genetic counseling and prenatal diagnosis. Methods Hematological characteristics of 283 patients with HbH diseases in Guangdong Province were analyzed. Blood routine parameters and HbH content of various genotypes of HbH diseases in Guangdong Province were obtained by blood routine detection and hemoglobin electrophoresis, and the gene of thalassemia was detected by gap-PCR and PCR-RDB. Results Among 283 patients with HbH diseases, 202 cases （71.38%） were diagnosed with deletional HbH diseases including 132 cases of --^SEA/-α^3.7 and 70 cases of --^SEA/-α^4.2. There were 81 cases of non-deletional HbH diseases including 7 cases of --^SEA/α^QSα⁷, 46 cases of --^SEA/α^WSαand 28 cases of --^SEA/α^CSα. The average Hb level in the non-deletional HbH group （except--^SEA/α^WSα） was （78.69±15.65）g/L, significantly lower than （96.69±15.72） g/L in the deletional HbH group （P < 0.001）. The average HbH in the non-deletional HbH group （except --^SEA/α^WSα） was （15.65±6.18）%, significantly higher than （7.00±4.18）% in the deletional HbH group （P < 0.001）. In the pregant women, the red blood cell level was （3.37±0.71）×10¹²/L, and the Hb level was （66.75±14.27） g/L. Conclusions Among all 283 cases of HbH disease in Guangdong Province, a majority of them are diagnosed with deletional HbH diseases, mainly --^SEA/-α^3.7, followed by --^SEA/-α^4.2. The degree of anemia in the non-deletional HbH group is more severe than that in the deletional HbH group, especially in the pregnant women.

Key words： HbH disease; Thalassemia; Hematological characteristics

α-地中海贫血,是地中海贫血的其中一种类型,是由α-珠蛋白基因的缺失或点突变而引发的一组溶血性贫血,是我国长江以南地区最常见的一种单基因遗传病^[1]。血红蛋白H（HbH）病患者能存活,但该病是临床表现最严重的一种α-地中海贫血,是由3个α-珠蛋白基因缺失或突变导致α珠蛋白肽链合成明显减少,过多的珠蛋白链形成四聚体所致的一种中间型地中海贫血^[2]。根据基因类型不同HbH病可被分为缺失型与非缺失型,2种类型的HbH病患者的临床表现差异很大,可表现为轻度至重度贫血,其中基因型为--^SEA/-α^3.7、--^SEA/-α^4.2及--^SEA/α^WSα的HbH病患者贫血程度偏轻;而基因型为--^SEA/α^CSα和--^SEA/α^QSα的HbH病患者贫血程度偏重。在本研究中,笔者对广东地区283例不同基因型的HbH病患者进行基因诊断并分析其血液学特征,现将结果报告如下。

对象与方法

一、研究对象

2015年1月至2020年1月就诊于广东省妇幼保健院医学遗传中心、基因诊断结果为HbH病的283例成年患者被纳入研究,新生儿和幼儿因生理性等因素,其血液学指标尚不太稳定,且其正常参考值范围跟成年人不同,故仅选取成年HbH病患者进行统计。283例中男96例、女188例（包括83例孕妇）,年龄18 ~ 50岁,均为来源于广东地区的汉族人（其中广州市217例、云浮市41例、河源市11例、湛江市5例、韶关市5例、清远市2例、肇庆市2例）。

二、研究方法

采集所有患者外周血进行血常规检测和Hb电泳分析,提取外周血基因组DNA用于地中海贫血基因检测,分析不同基因型的HbH病患者血液学特征。

1. 血液学分析

用EDTA-K2 真空采血管采集所有患者（无需空腹）的外周静脉血2 ml。采用Sysmex KX-21血液分析仪测定其红细胞参数。采用全自动毛细管电泳仪（Capilar 2,Sebia,法国产）进行Hb分析。

2. DNA提取和地中海贫血基因检测

采用Lab-Aid 820核酸提取仪及DNA提取试剂（厦门产）提取基因组DNA,根据试剂盒说明书及仪器操作规程严格遵守标准操作规程操作。应用裂口PCR（gap-PCR）和PCR结合反向点杂交（PCR-RDB）方法进行常规地中海贫血基因检测（试剂盒深圳产）,同时利用Luminex200（Luminex Corporation,美国产,试剂采用达安临床检验中心有限公司扩增及杂交试剂）进行基因诊断结果的相互验证。检测范围包括α-地中海贫血3种常见缺失型（3.7、4.2、SEA）和3种点突变类型（CS、QS、WS）以及中国人最常见的17种β-地中海贫血的点突变。

三、统计学处理

采用SPSS 20.0处理数据,计量资料用$\bar{x}±s$表示,两组独立样本比较采用t检验,多组间比较采用方差分析,两两比较采用Bonferroni法;计数资料采用例（％）表示,组间比较采用$\chi$²检验,α= 0.05。

结果

一、缺失型与非缺失型HbH病患者性别、年龄比较

缺失型与非缺失型HbH病患者性别、年龄无差异（P均> 0.05）,见表1。

表1 缺失型与非缺失型HbH病患者性别、年龄比较 [例（%）]

变量	分类	非缺失型HbH病（81例）	缺失型HbH病（202例）	$\chi$²值	P值
性别	男	24（29.6）	72（35.6）	0.933	0.334
性别	女	57（70.4）	130（64.4）	0.933	0.334
年龄（岁）	18 ~ 29	48（59.3）	137（67.8）	2.055	0.358
	30 ~ 39	28（34.6）	53（26.2）
	40 ~ 50	5（6.2）	12（6.0）

二、血常规参数检测结果

283例HbH病患者中,202例缺失型HbH病患者Hb为（96.69±15.72）g/L,红细胞为（5.28± 0.95）×10¹²/L,平均红细胞体积（MCV）为（63.21±8.68）fl,平均红细胞血红蛋白含量（MCH）为（18.48±2.05）pg;35例非缺失型HbH病患者（除--^SEA/α^WSα外）Hb为（78.69±15.65）g/L,红细胞为（4.03±0.94）×10¹²/L,MCV为（73.96 ±8.00）fl,MCH为（19.71±1.86）pg,非缺失型HbH病患者（除--^SEA/α^WSα外）Hb水平比缺失型HbH病患者低（P < 0.001）;非缺失型HbH病患者（除--^SEA/α^WSα外）MCV、MCH均比缺失型HbH病患者高（P < 0.05）,见表2。其中83例孕妇的红细胞计数较低,为（3.37±0.71）×10¹²/L,Hb含量也较低,为（66.75 ±14.27）g/L。

表2 缺失型与非缺失型HbH病患者（除--^SEA/α^WS外）血液学参数及构成比比较

基因型	例数	红细胞（×10¹²/L）	Hb（g/L）	MCV（fl）	MCH（pg）	构成比（%）
非缺失型（除--^SEA/α^WS外）	35	4.03±0.94	78.69±15.65	73.96±8.00	19.00±1.86	12.37
缺失型	202	5.28±0.95	96.69±15.72	63.20±8.68	18.40±2.05	71.38
t值		-7.190	6.259	-7.810	-3.358
P值		< 0.001	< 0.001	< 0.001	0.001

三、Hb电泳检测结果

非缺失型病例组（除--^SEA/α^WSα外）HbH含量比缺失型病例组的HbH含量高（P < 0.001）;--^SEA/α^CSα型HbH病HbA2含量比缺失型病例组低,--^SEA/α^CSα型病例组HbF含量比缺失型病例组高,但差异均无统计学意义（P > 0.05/2）,见表3。孕妇HbH含量相对较高,为（11.64±3.29）%。

表3 缺失型与非缺失型HbH病（除--^SEA/α^WS外）Hb分析参数对比

基因型	例数	HbH（%）	HbA2（%）	HbF（%）
非缺失型（除--^SEA/α^WS外）	35	15.65±6.18	1.91±1.01	0.93±0.70
--^SEA/α^CSα	28	13.64±4.40	0.96±1.04	0.96±0.81
缺失型	202	7.00±4.18	1.85±0.65	0.72±1.27
非缺失型（除--^SEA/α^WS外）与缺失型比较
t值		-7.979	2.811	-0.547
P值		< 0.001	0.001	0.586
--^SEA/α^CSα型与缺失型比较
t值		6.028	-0.927	-0.547
P值		< 0.001	0.355	0.586

注：P < 0.05/2为差异有统计学意义

四、珠蛋白基因检测结果

283例HbH病患者中,缺失型HbH病202例,占71.38%;其中--^SEA/-α^3.7132例,占46.64%;--^SEA/-α^4.2 70例,占24.73%。非缺失型HbH病81例,占28.62%;其中--^SEA/α^QSα 7例,占2.47%;--^SEA/α^WSα 46例,占16.25%;--^SEA/α^CSα 28例,占9.89%。--^SEA/-α^3.7与--^SEA/-α^4.2 2种基因型的病例组各项血液学指标的差别不明显,均无统计学意义（P > 0.05/10）;--^SEA/α^WSα和--^SEA/α^CSα 2种基因型的病例组与以上2种具有较明显的差异（P < 0.05/10）,见表4。

表4 各基因型HbH病血液学参数及构成比比较

基因型	例数	红细胞（×10¹²/L）	Hb（g/L）	MCV（fl）	MCH（pg）	构成比（%）
--^SEA/α^CSα	28	3.93±0.80	77.71±15.21	74.82±6.37	19.90±1.76	9.89
--^SEA/α^WSα	46	5.49±0.82^a	115.85±15.13^a	67.06±4.94^a	21.24±1.66	16.25
--^SEA/α^QSα	7	4.86±1.24	82.57±15.66^b	70.53±11.57	18.97±1.93	2.47
--^SEA/-α^3.7	132	5.35±0.96^a	97.80±15.38^ab	63.04±7.64^ab	18.45±1.94^b	46.64
--^SEA/-α^4.2	70	5.14±0.90^a	94.60±16.03^ab	63.53±10.37^a	18.52±2.25^ab	24.73
F值		16.287	29.152	18.278	19.626
P值		< 0.001	< 0.001	< 0.001	< 0.001

注：与--^SEA/α^CSα比较,^aP <0.05/10;与--^SEA/α^WSα比较,^bP < 0.05/10

讨论

根据基因突变类型HbH病主要被分为缺失型和非缺失型2种类型。缺失型HbH病是由于缺失3个α-基因（-/α-）或（-/-α）导致α-珠蛋白链合成不足所致,非缺失型HbH病是由2个α-基因缺失与一个α-基因突变相互作用所致（-/α^Tα或-/αα^T）,其临床表现往往比前者更为严重^[3]。

HbH病的基因类型与特变频率在不同国家、不同地区、不同种族间有一定的差异。国外曾有HbH病的基因类型与特变频率的相关报道,如Farashi等^[4]报道,伊朗HbH病以缺失型为主,基因型主要为--^MED/-α^3.7（31.8%）,其次为--^20.5/α-^5ntα和α^TSaudiα/α^TSaudiα。在国内也有对HbH病的基因类型与特变频率的相关报道,黄雅莉等^[5]报道,广东湛江地区HbH病基因型以缺失型为主（88%）,其中基因型--^SEA/-α^3.7与基因型--^SEA/-α^4.2的构成比分别为61.45%和26.50%。本研究中广东地区283例HbH病患者的基因型分析显示,其基因型主要以缺失型为主（71.38%）,以--^SEA/-α^3.7占大多数,这与周冰焱等^[6]报道的广东省育龄人群241例HbH病基因型构成比相似,而与庞艳敏等^[7]报道的广西地区1110例HbH病患者的基因型、血液学表型和铁过载的临床研究的基因构成比有一定差异,提示不同的地区HbH病基因型构成比不同。

另外,在本研究中,孕妇的Hb含量相对更低,临床上出现中度至重度贫血。这与孕妇生理性贫血可能相关。女性怀孕期间的生理变化,如血容量的扩大,会加重贫血的严重程度,而且慢性母体贫血不但会使自身处于缺氧状态,还会导致胎儿生长受限以及增加低体质量儿出生、早产及围产期死亡率的风险^[8]。本研究组虽无对未成年人HbH病进行研究,但相关报道表明,HbH病患儿仍然以缺失型为主,其临床表现有比较大的异质性;而非缺失型HbH病患儿的贫血程度比较严重,且初诊平均年龄较缺失型早,婴幼儿后期逐渐出现贫血症状,随着年龄增大贫血程度加重^[9]。

综上所述,认识各基因型HbH病的血液学表现,有助于在产前诊断及遗传咨询过程中向临床医师提供更好的依据,也有利于给予患者更好更全面的意见建议。今后,我们将积累和分析更多的包括其他罕见缺失型突变类型HbH病病例的数据,以求获得更精确的分析结果。

参考文献

原文顺序 | 文献年度倒序 | 文中引用次数倒序

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