一、NF-κB与MM的关系
NF-κB是在B淋巴细胞中被首次发现的, 其能与Ig-κ轻链基因近端的增强子元件结合, 调控Ig表达、组装和分泌等功能。MM是浆细胞恶性增殖性疾病, NF-κB通路参与了MM的病理生理过程。目前发现NF-κB家族由5个成员组成, 包括NF-κB1 （p50/p105）、NF-κB2（p52/p100）、RelA（p65）、RelB及c-Rel, 它们两两结合形成同源或异源二聚体存在于细胞中[2]。NF-κB在哺乳动物细胞中以p65最为常见（下文所提及的NF-κB均指p65）。一般情况下, NF-κB抑制蛋白（IκB）与NF-κB二聚体结合成三聚体, 结合状态下的NF-κB存在于细胞质, 无生物学活性。当结合状态下的NF-κB受到外界或内在因子刺激后, IκB发生磷酸化, 被蛋白酶所降解, 这时游离状态下的NF-κB进入细胞核内分别与细胞黏附分子基因、促炎症细胞因子、趋化因子基因或促存活基因结合, 调控mRNA的表达[3]。治疗MM的药物如蛋白酶抑制剂（硼替佐米）、环磷酰胺等均可以通过抑制IκB的降解来减少NF-κB的核转移[4]。
NF-κB的异常激活是多种疾病状态的基础, NF-κB不仅在MM发病中起重要作用, 而且对其治疗也同样重要。NF-κB所调控的不同的下游因子, 会对细胞起不同的作用, 如NF-κB通过调节细胞因子IL-6、血管内皮生长因子（VEGF）、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、基因金属蛋白酶9（MMP9）、抗调亡基因（Bcl/Bax）以及耐药基因产物（Pg-p）等的表达来调控MM细胞的增殖、侵袭、调亡及耐药等[2]。而且至少有17%的初发性MM和42%的复发性MM患者体内存在着与NF-κB通路相关的主要成分及调节因子的突变[2]。另有研究表明, 在耐硼替佐米的MM细胞核内高表达NF-κB, 在治疗方案中联合使用NF-κB抑制剂或激活剂可以提高或降低硼替佐米的疗效[5]。因此通过调控NF-κB的活性, 不仅可以抑制MM细胞的增殖、侵袭, 促进其凋亡, 而且可以增加药物的敏感性, 降低耐药发生率及复发率, 靶向NF-κB对MM的治疗及耐药至关重要。
二、miR概述
miR是一段长度21~25个核苷酸的单链非编码RNA, 常存在于不稳定染色体区, 已被证实在多种疾病中发挥着重要作用。对某些特定miR表达的检测有助于对疾病的诊断、治疗及预后情况的评估。作为基因调控因子, miR本身可被其他因子调节, 或参与不同的信号通路, 从而在人体内构成了复杂的信息交通网络。
三、与NF-κB相关的miR对MM细胞的生长及耐药的影响
1. miR-21
miR-21位于17号染色体短臂上, 被证实在多种肿瘤中过度表达, 参与了肿瘤的增殖、浸润、侵袭和转移等。Ma等[6]发现在MM患者骨髓中miR-21的表达较正常者高, 在 MM细胞中加入miR-21抑制剂后可抑制MM细胞的生长。Rossi等[7]的研究证实miR-21过表达可降低硼替佐米的敏感性, miR-21还可以通过调节辅助性T 细胞17（Th17）的表达量延缓MM患者溶骨性病变的进展。NF-κB的调控对miR-21起着重要作用。Hu等（2013年）发现miR-21的启动子上有2个NF-κB结合位点, NF-κB亚基与miR-21启动子结合元件结合调控miRNA-21的表达, 抑制NF-κB后miR-21的表达下调。NF-κB与miR-21之间也还可能存在其他潜在的调控方式, IL-6已被证实对MM的发生、血管生成等起重要作用, 是MM细胞重要的生长因子。通过调节miR-21的表达可以促进间充质干细胞的增殖和转化, 转化的间充质干细胞可以分泌IL-6, IL-6被证实可以促进NF-κB的分泌, 同样IL-6也可以STAT-3依赖方式诱导miR-21的表达[6⇓⇓-9]。因此推测NF-κB与miR-21之间可能通过IL-6为枢纽间接相互调控, 同时miR-21也可通过IL-6为媒介促进自我表达, 但以上推测仍需大量基础研究验证。综上所述, NF-κB对MM细胞起着重要作用的原因之一是调控miR-21的表达, miR-21调控下游相关mRNA的表达促进MM细胞生长, 进一步研究NF-κB与miR-21的相互作用, 阻断两者的信号传导或能成为治疗MM的手段。
2. miR-16
miR-16位于13q14染色体上, 这是MM常见的染色体缺失区域, 13号染色体在MM患者中的缺失率为50%, 而在疾病活跃期的缺失率可超过70%。13号染色体的缺失可成为MM发病的独立危险因素及可靠的诊断指标。Khalife等[10]认为13号染色体与miR-16有明显的相关性, miR-16是MM细胞通过细胞外囊泡分泌释放的, miR-16可以直接下调IκB激酶（IKKα/β络合物）的表达, 抑制IκB的降解, 抑制NF-κB向核内转移。硼替佐米是MM治疗方案中不可或缺的蛋白酶抑制剂, 增加miR-16的表达可以抑制IκB的磷酸化及降解, 从而增加MM细胞对硼替佐米的敏感性[10]。NF-κB通过刺激骨髓基质细胞分泌的IL-6呈时间及剂量依赖性地抑制MM细胞中miR-16的表达。这表明miR-16与NF-κB可以相互调节, 在生理条件下两者的调控处于动态平衡, 当机体受到外界及内在异常因素刺激时, 这种平衡难以维持, 产生一系列病理反应, 高水平的miR-16与MM患者生存期延长明显相关, 因此上调miR-16的表达改善MM细胞的耐药性及延长患者寿命可能是一种可行的思路。但亦有研究者认为miR-16虽然位于13q14, 但13q14缺失与miR-16的表达无关, miR-16的表达与MM患者的预后无关, 但miR-16对MM诊断的敏感度可达100%, 特异度达73%[11]。上述研究均支持miR-16可作为MM可靠诊断指标的观点, 至于miR-16与MM患者的预后及与耐药性的关系还需更多的研究进一步证实。
3. miR-9
miR-9家族分别位于1q22、5q14.3、15q26.1染色体上, miR-9在不同的肿瘤中分别起着抑制或促进肿瘤细胞生长的作用。Huang等[12]的研究表明miR-9可以促进MM细胞的生长, 抑制其凋亡, 在MM细胞中过表达miR-9可以增强NF-κB的激活, 敲除miR-9后NF-κB的表达和IκB磷酸化程度均下调, 因此可以推断miR-9可通过某种机制来调控NF-κB的表达。Zhang等（2015年）提出在MM中NF-κB的激活可能是通过降低miR-9的甲基化来介导的, 但是值得关注的是, miR-9的甲基化在初诊MM患者中较少见, 在复发性MM患者中则呈特异性表达。因此miR-9对NF-κB的调节作用可能在复发性MM患者中具有更为重要的意义, 但目前对其作用机制的相关研究较少。
4. miR-129
miR-129是近年来新发现的miR, 在多种肿瘤中miR-129的比例明显失衡。在MM细胞中miR-129的表达水平较正常细胞低, 通过上调或下调miR-129的表达后发现过表达miR-129可以抑制MM细胞增殖, 诱导细胞凋亡, 给予NF-κB抑制剂后可以上调miR-129的表达从而抑制细胞增殖[13]。通过上调miR-129的表达可以明显抑制NF-κB在细胞核中的富集[14]。NF-κB通路对miR-129介导的功能起着重要作用, 但具体调控机制还有待进一步研究。在肠道炎症性疾病中, miR-129可以通过负调控一种新型的E3泛素连接酶（FBW7）抑制IκB的泛素化及降解从而抑制NF-κB的核转移[15]。但在MM细胞中该调控机制尚未得到证实, 仍需进一步探究, 但这为相关研究提供了可行的方向。
5. miR-29
miR-29家族目前有3个成员—— miR-29a、miR-29b、miR-29c, 现有针对MM的研究大多数以miRNA-29b为主。在MM细胞中上调miR-29b的表达可以抑制IκB的磷酸化, 显著抑制NF-κB的转录活性, 进而抑制肿瘤细胞的增殖, 诱导肿瘤细胞的调亡[16]。值得注意的是, 在间充质干细胞中IL-8已经被证实是NF-κB功能激活的重要因子[17]。Nicola Amodio等（2013年）发现miR-29可以显著下调IL-8 mRNA的表达, 抑制MM细胞中IL-8 mRNA的表达, 这可能是miR-29抑制细胞迁徙能力的重要原因。miR-29c可以增加去泛素化酶A20的表达量, A20的过表达可以抑制NF-κB启动子的激活[18]。Balkhi等（2014年）认为miR-29c可以阻止人抗原R（HUR, 又称ELAVL1）与A20 基因3′非编码区（3′ UTR）的结合及合成RNA, 降解RNA诱导沉默复合物（RISC）, 从而保证A20的转录。MM中miR-29c的研究鲜见, 但miR-29c对A20起着重要作用, 即miR-29c可能间接对MM起重要调控作用, 但这还有待进一步验证。Zhou等[19]的研究证实, NF-κB可以与miR-29的启动子结合抑制miR-29的转录及表达, 这表明miR-29与NF-κB在一定程度上可以相互调节。
6. miR-202
骨髓间充质干细胞（BMSC）可以分泌多种因子促进MM细胞的生长, 包括B细胞活化因子（BAFF）。Shen等[20]发现在MM患者的BMSC中miR-202低表达、BAFF高表达, 进一步研究发现, miR-202可以抑制BMSC中NF-κB的表达, 且NF-κB参与了BMSC中BAFF的生成过程, 从而调节MM细胞在骨髓基质中的黏附性。这提示miR-202或可成为抑制MM细胞侵袭及迁移的重要靶点之一。
四、结论与展望
到目前为止MM仍是不可治愈的疾病, 而且现有的治疗方案常给患者带来不同程度的药物不良反应, 不少患者因不能耐受而不得不终止治疗, 复发性MM的耐药性升高, 新药研发对MM疾病的治疗及降低耐药率尤为迫切。目前已经明确NF-κB可以影响MM细胞在局部微环境中的增殖、存活及耐药性, 是治疗MM的重要靶点之一。miR在机体中可以发挥错综复杂的作用, MM细胞中大多数miR可以与NF-κB相互调节, 当然在人体正常细胞中也存在着NF-κB的调控机制, 对正常的生理活动也有调节作用, 若可通过干扰miR的活性从而选择性干扰NF-κB的活性, 保留其在正常细胞中的功能, 减轻药物对MM患者的不良反应, 或会为MM患者带来新的希望, 目前NF-κB与miR两者的相互作用在MM中研究较少, 因此深入研究两者关系或能为MM的治疗带来突破。